Description of the parasitic fauna of a specimen of Didelphis albiventris at Rio Grande do Sul.

Didelphis albiventris is considered the most common marsupial in Rio Grande do Sul. With omnivorous and synanthropic habits, it can serve as a host to various parasites, playing an important role in maintaining their biological cycle. Despite being a widespread and abundant species, it has a relatively little-known parasitic fauna. Therefore, the aim of this study was to report the diversity of parasites in a fecal sample from D. albiventris in Rio Grande do Sul, Southern Brazil. Modified Centrifugal-flotation and Spontaneous sedimentation techniques were used, revealing a high taxonomic diversity of parasites. Eggs of Ancylostoma spp., Toxocara spp., and Anoplocephalidae were reported for the first time in the host in the southern region of the country, along with the first report of pseudoparasitism by Syphacia spp. and Monocystis spp. in this animal species. The presence of different parasites in the feces of D. albiventris is of utmost importance, primarily for public health, but also for understanding the biodiversity of parasites present in wildlife, which has been poorly studied until now. This allows the implementation of effective strategies for controlling, preventing and treating these diseases.

Didelphis albiventris é considerado o marsupial mais comum no Rio Grande do Sul. Com hábitos onívoros e sinantrópicos, pode servir de hospedeiro para diversos parasitas, desempenhando importante papel na manutenção do seu ciclo biológico. Apesar de ser uma espécie difundida e abundante, possui uma fauna parasitária relativamente pouco conhecida. Portanto, o objetivo deste estudo foi relatar a diversidade de parasitas em uma amostra fecal de D. albiventris no Rio Grande do Sul, Sul do Brasil. Foram utilizadas técnicas modificadas de flutuação centrífuga e sedimentação espontânea, revelando uma alta diversidade taxonômica de parasitas. Ovos de Ancylostoma spp., Toxocara spp. e Anoplocephalidae foram relatados pela primeira vez no hospedeiro na região sul do país, juntamente com o primeiro relato de pseudoparasitismo por Syphacia spp. e Monocystis spp. nesta espécie animal. A presença de diferentes parasitas nas fezes de D. albiventris é de extrema importância, principalmente para a saúde pública, mas também para a compreensão da biodiversidade de parasitas presentes na vida selvagem, que tem sido pouco estudada até agora. Isto permite a implementação de estratégias eficazes para controlar, prevenir e tratar estas doenças.

Ctenocephalides felis (Siphonaptera, Pulicidae) parasitizing White-eared opossum (Didelphis albiventris) at Southern Brazil - Case report.

Didelphis albiventris is a marsupial with synanthropic habits, whose contact with domestic animals and humans is increasing. They are considered potential disseminators of diseases, present as definitive hosts or reservoirs of various pathogenic agents. The present study aim to report, for the first time, the parasitism by Ctenocephalides felis in D. albiventris in Rio Grande, Southern Rio Grande do Sul state, Brazil. An adult female White-eared Opossum (D. albiventris), killed by being run over, was collected on the roads of the city of Rio Grande, Rio Grande do Sul, Brazil and sent to the laboratory for necropsy. During external inspection, a flea was found, which was stored in 70o alcohol until taxonomic identification, being classified as C. felis. This study reports the occurrence of parasitism by C. felis in D. albiventris for the first time in the location studied, demonstrating that these arthropods circulate between the wild and urban environments, and play an important role in the cycle of zoonotic pathogens among wild fauna, companion animals and humans.

Didelphis albiventris é um marsupial de hábitos sinantrópicos, cujo contato com animais domésticos e humanos está aumentando. São considerados potenciais disseminadores de doenças, apresentando-se como hospedeiros definitivos ou reservatórios de vários agentes patogênicos. O presente estudo tem como objetivo relatar, pela primeira vez, o parasitismo por Ctenocephalides felis em D. albiventris em Rio Grande, Sul do Rio Grande do Sul, Brasil. Uma fêmea adulta de gambá-de-orelha-branca (D. albiventris), morta por atropelamento, foi recolhida nas estradas da cidade de Rio Grande, Rio Grande do Sul, Brasil e encaminhado ao laboratório para necropsia. Durante inspeção externa foi encontrada uma pulga que foi armazenada em álcool 70º até a identificação taxonômica sendo classificado como C. felis. Este estudo relata a ocorrência de parasitismo por C. felis em D. albiventris para o primeira vez no local estudado, demonstrando que esses artrópodes circulam entre a natureza e ambientes urbanos e desempenham um papel importante no ciclo de patógenos zoonóticos entre a fauna selvagem, animais de companhia e humanos.

PCR-based identification of Neospora caninum in the umbilical cord of a newborn calf in Brazil / Identificação de Neospora caninum por PCR em cordão umbilical de bezerros recém nascido no Brasil

ABSTRACT: This study was conducted at a beef cattle breeding farm in the far southern region of Brazil. The birth of a calf with unilateral corneal opacity was immediately reported to the Laboratory of Parasitology, in the Universidade Federal de Pelotas, Rio Grande do Sul, Brazil; blood was collected from the cow and calf before colostrum intake. The umbilical cords from this calf and from six other healthy animals were collected. Serological examination, utilizing an indirect fluorescent antibody test, was done using a cut-off point of 1:100. Polymerase chain reaction (PCR) was also performed using the umbilical cord samples. Serological tests showed that the calf was positive for Neospora caninum at birth, with a titer of 1:1600; a titer of 1:3200 was reported in the dam. PCR, using umbilical cord tissue from the affected animal, was positive for the presence of this parasite, and the molecular identity of the amplified product was confirmed by sequencing. Therefore, the detection of N. caninum DNA in the umbilical cord represents a novel alternative test for the diagnosis of this parasitic infection in newborn calves that are clinically suspected to have neosporosis.

RESUMO: O estudo foi realizado em uma fazenda de criação de gado de corte na região do extremo sul do Brasil. O nascimento de um bezerro com opacidade unilateral da córnea foi imediatamente relatado ao Laboratório de Parasitologia da Universidade Federal de Pelotas (RS) e coletou-se sangue da vaca e do bezerro antes da ingestão do colostro. Foram coletados sangue e cordão umbilical do bezerro com opacidade na córnea bem como de outros seis bezerros aparentemente saudáveis antes da ingestão de colostro. Foram realizados exames sorológicos utilizando o teste indireto de anticorpos fluorescentes (IFAT) com ponto de corte de 1: 100 e reação em cadeia da polimerase (PCR). O resultado dos exames sorológicos mostraram que o bezerro foi positivo para N. caninum ao nascer com titulação de 1:1600 e o de sua mãe foi de 1:3200 na IFAT. A PCR do cordão umbilical foi positiva para o agente no animal com opacidade córnea unilateral e a identidade molecular do produto amplificado foi confirmada por sequenciamento. A detecção de DNA de N. caninum no cordão umbilical é uma nova alternativa para o diagnóstico deste agente em bezerros recém-nascidos com suspeita clínica de neosporose.

The incidence and productive significance of ovine toxoplasmosis in Southern Brazil / Incidência e significância econômica da toxoplasmose ovina no sul do Brasil

ABSTRACT: This research aimed to determine incidence of Toxoplama gondii infection in Corriedale sheep in southern Brazil during pregnancy and the extent of associated losses. Blood samples were collected from 411 Corriedale sheep in two flocks at different locations in the state of Rio Grande do Sul (Brazil). Presence of T. gondii was diagnosed by the Indirect Fluorescent Antibody Technique (IFAT). Seroprevalence of T. gondii during pre-mating was 20.2%, with no significant difference between the two flocks studied. Infection by T. gondii was influenced by ewes'age (P≤0.05). The pre-mating seroprevalence did not influence either returning to estrus or pregnancy rates. Weaning rate was significantly higher in pre-positive dams compared to negative ones (87.9 and 74.1%, respectively - P<0.05). The incidence of seroconversion was 16.5% (54/328). In seroconverted ewes, a high rate of return to estrus was observed (P≤0.05). The incidence of toxoplasmosis suggests production losses equivalent to 1.87% per year, in this system production. In addition, toxoplasmosis decreased the number of lambs per ewe. Therefore, to improve livestock performance, T. gondii infection should be monitored and controlled in the studied area.

RESUMO: Este trabalho tem como objetivo determinar a incidência da infecção pelo T. gondii em ovinos, durante o período gestacional e a extensão das perdas associadas. Amostras de sangue foram coletadas de 411 ovelhas Corriedale em dois rebanhos, em diferentes locais do Rio Grande do Sul, Brasil. Presença de T. gondii foi diagnosticada pela técnica de imunofluorescência indireta (RIFI). A soroprevalência no pré-acasalamento foi de 20,2%, sem diferença significativa entre os dois rebanhos estudados. A infecção por T. gondii foi influenciada pela idade (P ≤0,05). A soroprevalência no pré-acasalamento não influenciou a taxa de retorno ao estro e a taxa de prenhez. Taxa de desmame foi significativamente maior nas ovelhas positivas na pré-cobertura em comparação com as negativas (87,9 e 74,1%, respectivamente - P<0,05). A incidência de soroconversão foi de 16,5% (54/328). Em ovelhas que soroconverteram, uma alta taxa de retorno ao estro foi observada (P≤0,05). A incidência da toxoplasmose sugere perdas de produção equivalentes a 1,87% ao ano nestes sistemas. Além disso, a toxoplasmose diminuiu o número de cordeiros por ovelha. Portanto, para melhorar o desempenho produtivo nos rebanhos ovinos, a infecção por T. gondii deve ser monitorada e controlada na área estudada.

Patogenicidade e virulência de Toxoplasma gondii isolado de suínos de criação artesanal no sul do Brasil / Patogenicity and virulence of Toxoplasmagondii isolated from rustic farm pigs in Southern Brazil

Studies of Toxoplasma gondii infection in pigs are important because they are part of the human food chain. The main routes of transmission of this agent are: carnivorism, fecal-oral and congenital. Six isolates of T. gondii from pigs of rustic farms were evaluated for virulence and pathogenicity. Tachyzoites suspension used in the tests was obtained by aspiration or by washing the peritoneal cavity of mice that had developed ascites. Each sample of living tachyzoites was inoculated into groups of five mice with inoculum of 10¹, 10², 10³, 10(4), 10(5) and 10(6) intraperitoneally. Half of the isolates (3/6) were lethal and caused clinical signs in Swiss albino mice. The minimum lethal dose was 10³ tachyzoites by inoculum. The death of mice that had acute infection occurred between 12 and 26 days post-inoculation. The other three isolates were not pathogenic or virulent for mice. All isolates of the area studied had a high ability to form cysts, what could increase the risk for infection through ingestion of infected animal tissues.

Estudos com Toxoplasma gondii em suínos são relevantes porque seus produtos e subprodutos fazem parte da cadeia alimentar do ser humano. As principais vias de transmissão deste agente são o carnivorismo, fecal-oral e congênita. Seis isolados de Toxoplasma gondii de suínos de criação artesanal foram avaliados quanto à patogenicidade e virulência em camundongos suíços albinos. A suspensão de taquizoítos utilizada nos testes foi obtida através da punção ou lavagem da cavidade peritoneal de camundongos que apresentaram ascite. Cada amostra foi inoculada em grupos de cinco camundongos, com inóculo de 10¹, 10², 10³, 10(4), 10(5) e 10(6) taquizoítos vivos, via intraperitoneal. Dos isolados, 50% (3/6) foram letais e causaram sinais clínicos nos camundongos. A dose mínima letal foi de 10³ taquizoítos. A morte dos animais que apresentaram infecção aguda ocorreu entre 12 e 26 dias após a inoculação. Todos os isolados da região estudada apresentam alta capacidade de formar cistos, o que pode aumentar o risco de infecção pela ingestão de tecidos dos animais infectados pelos mesmos.

Comparison of three larval bioassays to evaluate susceptibility of Rhipicephalus (Boophilus) microplus to amitraz / Comparação de três bioensaios larvais para avaliar a suscetibilidade de Rhipicephalus (Boophilus) microplus ao amitraz

Field samples of Rhipicephalus (Boophilus) microplus from the state of Rio Grande do Sul, Brazil, were assessed using the following methods: larval packet test (LPT), larval immersion test (LIT) and syringe immersion test (SIT). The following parameters were determined for each population and for the Mozo susceptible reference strain: lethal concentration for 50% (LC50) with its 95% confidence interval (95% CI), regression line slope and resistance ratio (RR). Using the LPT, only one population was susceptible to amitraz, presenting a RR of 1.9. Using the same technique, the other populations presented RRs of between 92.9 and 3445.8 and were considered resistant. The LC50 of the Mozo strain calculated using the LPT, LIT and SIT was 2.9, 27.3, and 52.7 µg/mL, respectively. In general, a good fit to the probit statistical model was only achieved using the LPT. The results obtained in this study impair recommendations for using the LIT and SIT to diagnose amitraz resistance in R. (B.) microplus populations. Additional studies are required to improve the sensitivity of these tests in relation to the LPT.

Amostras de Rhipicephalus (Boophilus) microplus coletadas à campo no Rio Grande do Sul, Brasil, foram analisadas pelos seguintes métodos: teste do pacote de larvas (TPL), teste de imersão de larvas (TIL) e teste de imersão em seringas (TIS). Os seguintes parâmetros foram determinados para cada população e para a amostra referência suscetível Mozo: concentração letal para 50% (CL50) e seu intervalo de confiança de 95% (IC95%), inclinação da reta de regressão e os fatores de resistência (FR). Pelo TPL, apenas uma população foi sensível ao amitraz, com FR de 1,9. Utilizando a mesma técnica, as outras amostras apresentaram FR entre 92,9 e 3445,8 sendo consideradas resistentes. As CL50 da cepa Mozo calculadas por meio do TPL, TIL e TIS foram 2,9, 27,3 e 52,7 µg/mL, respectivamente. De forma geral, a adequação ao modelo estatístico de probitos só foi alcançada com o uso do TPL. Os resultados obtidos no presente estudo limitam a recomendação de uso do TIL e TIS para diagnóstico de resistência ao amitraz em populações de R. (B.) microplus. Estudos adicionais são necessários para aprimorar a sensibilidade destes testes em relação ao LPT.

Pancreatite intersticial crônica em bovino causada por Eurytrema coelomaticum / Chronic interstitial pancreatitis in cattle caused by Eurytrema coelomaticum

Descrevem-se os achados clínicos e patológicos atribuídos à infecção maciça por trematódeos pancreáticos do gênero Eurytrema (Loos, 1907) em uma novilha da raça Jersey, procedente do município de Seara, região oeste do estado de Santa Catarina, Brasil. O animal de dois anos de idade apresentava desenvolvimento insuficiente, emagrecimento crônico, caquexia, decúbito prolongado e anemia, sendo submetido à eutanásia in extremis. Na necropsia observou-se aumento de volume do pâncreas, que estava esbranquiçado, crepitante, com a superfície de corte irregular, onde foram visualizados inúmeros trematódeos emergindo ativamente do órgão. Histologicamente havia pancreatite intersticial crônica. O parasito foi identificado como Eurytrema coelomaticum (Giard & Billet, 1882). Trata-se do primeiro registro de euritrematose clínica em bovino no estado de Santa Catarina.

This study describes the clinical and pathological findings attributed to massive infection by pancreatic trematodes of the genre Eurytrema (Loos, 1907) in a female Jersey heifer from the city of Seara located in the west part of Santa Catarina state, Brazil. The two-year-old animal showed insufficient development, chronic emaciation, cachexia, prolonged decubitus and anemia, being euthanized in extremis. The necropsy indicated an enlarging of the pancreas which demonstrated crepitated pale surface of irregular cut and, where several trematodes were observed emerging actively from the organ. Histologically, there was chronic interstitial pancreatitis. The parasite was identified as Eurytrema coelomaticum (Giard & Billet, 1882). It is the first record of clinical Eurytrematosis in bovines in the state of Santa Catarina.

Transplacental transmission of Anaplasma marginale in beef cattle chronically infected in southern Brazil.

In this study, we have investigated the incidence of transplacental transmission of Anaplasma marginale in chronically infected cows with no history of acute anaplasmosis during gestation. In addition, we evaluated various techniques for detection of transplacental transmission of A. marginale. Blood samples were collected from 30 cows at three different periods: at the time of artificial insemination, at gestational diagnosis, and after calving. Also, blood was collected from the newborn calves, including one sample before colostrum intake, and another three days after birth. A. marginale-specific antibodies were detected in 100% of the cows with an indirect fluorescent antibody test (IFAT), and in 97% of them, using an indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Also, we observed that all of the three-day-old newborn calves were seropositive by IFAT. According to polymerase chain reaction, 63.3% of the cows were carriers of A. marginale, as well as 6.7% of the newborn calves. This represented a transplacental transmission rate of 10.5%. Furthermore, a correlation of 93.3% was observed between the two serodiagnostic techniques, demonstrating that both ELISA and IFAT can be used in epidemiological surveys of A. marginale. These results confirm the occurrence of transplacental transmission of A. marginale in chronically infected cows and suggest the importance of this transmission route in areas of enzootic instability.

Transplacental transmission of Anaplasma marginale in beef cattle chronically infected in southern Brazil / Transmissão transplacentária de Anaplasma marginale em bovinos de corte cronicamente infectados no sul do Brasil

In this study, we have investigated the incidence of transplacental transmission of Anaplasma marginale in chronically infected cows with no history of acute anaplasmosis during gestation. In addition, we evaluated various techniques for detection of transplacental transmission of A. marginale. Blood samples were collected from 30 cows at three different periods: at the time of artificial insemination, at gestational diagnosis, and after calving. Also, blood was collected from the newborn calves, including one sample before colostrum intake, and another three days after birth. A. marginale-specific antibodies were detected in 100% of the cows with an indirect fluorescent antibody test (IFAT), and in 97% of them, using an indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Also, we observed that all of the three-day-old newborn calves were seropositive by IFAT. According to polymerase chain reaction, 63.3% of the cows were carriers of A. marginale, as well as 6.7% of the newborn calves. This represented a transplacental transmission rate of 10.5%. Furthermore, a correlation of 93.3% was observed between the two serodiagnostic techniques, demonstrating that both ELISA and IFAT can be used in epidemiological surveys of A. marginale. These results confirm the occurrence of transplacental transmission of A. marginale in chronically infected cows and suggest the importance of this transmission route in areas of enzootic instability.

O objetivo do estudo foi avaliar a transmissão transplacentária de A. marginale em bovinos de corte cronicamente infectados utilizando diferentes testes de diagnóstico. Amostras de sangue foram colhidas de trinta matrizes durante o período de inseminação artificial, no diagnóstico de gestação e após o parto. Foi colhido sangue dos bezerros antes da ingestão do colostro e três dias após o nascimento. Anticorpos foram detectados em 100% das matrizes pela Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) e 97% pelo Ensaio de Imunoadsorção Enzimático Indireto (ELISA). Aos três dias de idade 100% dos bezerros estavam soropositivos na RIFI. Conforme os resultados da PCR, 63.3% das matrizes e 6.7% dos bezerros eram portadores do agente, representando taxa de transmissão transplacentária de 10.5%. Correlação de 93.3% foi observada entre os resultados das técnicas sorológicas, demonstrando que tanto ELISA quanto RIFI podem ser utilizadas em levantamentos epidemiológicos do agente. Os resultados confirmaram a transmissão transplacentária do agente em vacas cronicamente infectadas. Isto demonstra a importãncia desta via de transmissão do A. marginale em áreas de instabilidade enzoótica.

Comparison of three larval bioassays to evaluate susceptibility of Rhipicephalus (Boophilus) microplus to amitraz.

Field samples of Rhipicephalus (Boophilus) microplus from the state of Rio Grande do Sul, Brazil, were assessed using the following methods: larval packet test (LPT), larval immersion test (LIT) and syringe immersion test (SIT). The following parameters were determined for each population and for the Mozo susceptible reference strain: lethal concentration for 50% (LC50) with its 95% confidence interval (95% CI), regression line slope and resistance ratio (RR). Using the LPT, only one population was susceptible to amitraz, presenting a RR of 1.9. Using the same technique, the other populations presented RRs of between 92.9 and 3445.8 and were considered resistant. The LC50 of the Mozo strain calculated using the LPT, LIT and SIT was 2.9, 27.3, and 52.7 µg/mL, respectively. In general, a good fit to the probit statistical model was only achieved using the LPT. The results obtained in this study impair recommendations for using the LIT and SIT to diagnose amitraz resistance in R. (B.) microplus populations. Additional studies are required to improve the sensitivity of these tests in relation to the LPT.